Резюме
Введение. В настоящее время наблюдается резкий рост гинекологических заболеваний с патофизиологическими элементами дисплазии соединительной ткани и пролиферативных процессов в матке. В этом аспекте гиперплазия эндометрия занимает лидирующие позиции и наблюдается не только в период постменопаузы: для этого патологического процесса наблюдается весьма негативная тенденция к омоложению. Клиническое значение гиперплазии эндометрия заключается в связанном с ним риске прогрессирования рака эндометрия, а атипичные формы гиперплазии эндометрия рассматриваются как предраковые состояния. Частота и сроки малигнизации гиперплазии эндометрия достаточно вариабельны. Одни авторы считают, что частота онкотрансформации эндометрия колеблется в пределах от 25% до 50%, другие – до 80%.
Цель работы. Оценить лечебно-профилактическое действие низкомолекулярного хитозана на модели гиперплазии эндометрия у мышей, индуцированной гиперэстрогенемией.
Материалы и методы. 20 аутбредных нелинейных лабораторных ICR (CD-1) мышей (самок) со средней массой тела 20-22 г разделили на 2 группы по 10 животных в каждой. Гиперплазию эндометрия моделировали подкожным введением 0,1 мл 2%-го масляного раствора синестрола, 2 раза в неделю в течение двух недель. Животные опытной группы в качестве питья получали в течение всего эксперимента 0,05%-й водный раствор низкомолекулярного хитозана, а животные контрольной группы – питьевую воду. После выведения животных из эксперимента под эфирным наркозом печень и матку фиксировали в 10%-м растворе формалина и подвергали стандартной спиртовой гистологической проводке. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином по обычной методике. Высоту эпителия измеряли в микрометрах на поперечном срезе матки. Количество клеток в жировой дистрофии рассчитывали в процентах на 1 мм². Стекла со срезами сканировали на гистопатологическом сканере микропрепаратов KF-PRO-005 (Konfoong Biotech International Co., Ltd). Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы Statistica 10.0.
Результаты. Как видно из полученных результатов, низкомолекулярный хитозан обладает выраженным лечебно-профилактическим действием при гиперплазии эндометрия, которое проявляется снижением не только показателей гиперплазии эндометрия, но и объемной плотности гепатоцитов в состоянии жировой дистрофии.
Заключение. Полученные результаты объективно доказывают, что пероральное введение низкомолекулярного хитозана эффективно воздействует на все звенья этиопатогенеза гиперплазии эндометрия и может быть рекомендовано не только для профилактики этого заболевания, но и для предупреждения малигнизации гиперплазии эндометрия и профилактики онкологических заболеваний матки.
Конфликт интересов. Авторы статьи подтвердили отсутствие конфликта интересов, о котором необходимо сообщить.

В настоящее время наблюдается резкий рост гинекологических заболеваний с патофизиологическими элементами дисплазии соединительной ткани и пролиферативных процессов в матке. В этом аспекте гиперплазия эндометрия (ГЭ) как патология матки, представляющая собой спектр морфологических изменений эндометрия, занимает лидирующие позиции и наблюдается не только в период постменопаузы: этот патологический процесс имеет весьма негативную тенденцию к омоложению, все чаще встречаясь у женщин репродуктивного возраста.

ГЭ преимущественно характеризуется увеличением отношения эндометриальных желез к строме по сравнению с нормальным пролиферирующим эндометрием. Клиническое значение ГЭ заключается в связанном с ней риске прогрессирования рака эндометрия, а атипичные формы ГЭ рассматриваются как предраковые поражения. Частота и сроки малигнизации ГЭ достаточно вариабельны. Одни авторы считают, что частота онкотрансформации эндометрия колеб-лется в пределах от 25% до 50%, другие – до 80% [1].

Эстрогены – основной фактор, вызывающий пролиферацию эндометрия, которая при отсутствии достаточного влияния прогестерона прогрессирует в железистую гиперплазию. В связи с этим гиперэстрогенемия является основным этиопатогенетическим фактором развития ГЭ, при этом она может быть вызвана как эндогенным гормональным дисбалансом, так и введением лекарственных препаратов, например, тамоксифена [2, 3]. Однако морфогенез ГЭ, особенно в контексте малигнизации, до конца не изучен, что особенно важно для поиска эффективных фармакологических средств профилактики и лечения этого заболевания [4-7].

Факторы риска развития ГЭ весьма многообразны, наиболее значимыми из них являются ожирение и связанное с ним избыточное образование эстрогенов из андрогенов в жировой ткани, наследственность и генетические мутации, затянувшийся период менопаузального перехода, хроническая ановуляция, сахарный диабет (СД) 2-го типа и заболевания печени. Особенно значимый вклад в гормональный дисбаланс с гиперэстрогенемией вносят заболевания печени, так как именно в этом органе происходит биотрансформация эстрогенов до неактивных метаболитов. При этом ожирение на фоне метаболического синдрома (МС) и СД 2-го типа могут быть отнесены к важной коморбидной патологии, способствующей развитию хронической гиперэстрогенемии и ГЭ. Коррекция этих патологических процессов, например, при использовании широко распространенного гипогликемического средства метформина, является перспективным направлением профилактики ГЭ [8, 9].

Целью данной работы было оценить лечебно-профилактическое действие низкомолекулярного хитозана на модели ГЭ у мышей, индуцированной гиперэстрогенемией.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

20 аутбредных нелинейных лабораторных ICR (CD-1) мышей (самок) со средней массой тела 20-22 г разделили на 2 группы по 10 животных в каждой. ГЭ моделировали подкожным введением 0,1 мл 2%-го масляного раствора синестрола, 2 раза в неделю в течение двух недель. Животные опытной группы в качестве питья получали в течение всего эксперимента 0,05%-й водный раствор низкомолекулярного хитозана, а животные контрольной группы – питьевую воду. Через 2 дня после четвертого введения синестрола всех животных подвергали эвтаназии передозировкой диэтилового эфира.

После выведения животных из эксперимента под эфирным наркозом печень и матку фиксировали в 10%-м растворе забуференного формалина и подвергали стандартной спиртовой гистологической проводке. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином по обычной методике. Высоту эпителия измеряли в микрометрах на поперечном срезе матки. Количество клеток в жировой дистрофии рассчитывали в процентах на 1 мм². Стекла со срезами сканировали на гистопатологическом сканере микропрепаратов KF-PRO-005 (Konfoong Biotech International Co., Ltd).

Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы Statistica 10.0. Для множественных сравнений применяли критерий Краскела – Уоллиса, затем при парных сравнениях критерий Манна – Уитни. Данные представлены в виде M ± m, где M – выборочное среднее, m – стандартная ошибка. Уровень статистической значимости p принимали равным 0,05. Для исследования взаимосвязи между параметрами был выполнен корреляционный анализ с использованием программы Statistica 10.0 и коэффициента Пирсона.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Повреждения органов в обеих группах были сходными, однако в опытной группе, где применялся низкомолекулярный хитозан, они были менее выраженными.

Печень

Печень животных в обеих группах увеличена в размерах, имеет округлые края (в норме острые) и бледный, желтовато-коричневый цвет. При микроскопии на малом увеличении (×100) определяется диффузное нарушение нормальной архитектоники вследствие выраженной вакуолизации гепатоцитов. Дольчато-балочное строение печени стерто.

Наблюдается смешанный стеатоз с преобладанием крупнокапельного (макровезикулярного). Макровезикулярный стеатоз характеризуется крупными, четко очерченными оптически пустыми вакуолями, которые занимают почти всю цитоплазму и смещают ядро на периферию клетки (гепатоциты приобретают вид перстневидных клеток). Эти вакуоли соответствуют скоплениям липидов, растворенных в процессе гистологической проводки. Микровезикулярный стеатоз встречается реже, преимущественно в зонах, где макровезикулярный стеатоз выражен меньше. Цитоплазма таких гепатоцитов имеет пенистый мелкоячеистый вид. Ядро обычно сохраняет центральное расположение.

Преимущественно поражаются гепатоциты перивенулярной зоны вокруг центральных вен. В перипортальных зонах могут встречаться небольшие группы менее измененных гепатоцитов, что особенно характерно для субтотального, а не тотального поражения. Среди гепатоцитов с жировой инфильтрацией обнаруживаются отдельные баллонные гепатоциты. Это значительно увеличенные в размерах клетки (в 2-3 раза) с просветленной, оптически пустой или зернистой цитоплазмой. Их контуры нечеткие. Этот признак указывает на повреждение промежуточных филаментов цитоскелета и является маркером перехода от простого стеатоза к стеатогепатиту (рис. 1 и 2).

Просветы синусоидов сдавлены увеличенными в объеме гепатоцитами, из-за чего они визуализируются плохо. Воспалительная инфильтрация минимальна. Могут определяться единичные очаги, состоящие из лимфоцитов и макрофагов (купферовских клеток) в дольках, однако это не является доминирующим признаком на стадии субтотального гепатоза.

Эндометрий

Матки животных в группе контроля были немного утолщены и расширены. У животных обеих групп доля площади, занятой железами, значительно возросла, наблюдался значительный прирост железистого компонента. Однако в опытной группе с применением низкомолекулярного хитозана эти изменения были менее выражены. Железы расположены скученно, с неравномерной плотностью. В некоторых полях зрения можно увидеть картину «спина к спине», когда железы расположены вплотную друг к другу, а прослойки стромы между ними практически исчезают. Многие железы становятся кистозно-расширенными, с крупными полостями, выстланными уплощенным эпителием. Эпителий формирует складки и мелкие сосочковые выросты, вдающиеся в просвет железы. Значительно увеличивается высота покровного эпителия и эпителия желез (рис. 3 и 4).

Ядра клеток перестают располагаться в один ряд на базальном уровне, их расположение становится многослойным и беспорядочным. Это создает картину ложной многорядности эпителия. В поле зрения заметно увеличено количество фигур митоза. Одновременно с этим в ткани определяются множественные апоптозы.

В строме наблюдаются выраженный отек и очаговая лимфоидная инфильтрация.

Как видно из полученных результатов, низкомолекулярный хитозан обладает выраженным лечебно-профилактическим действием при ГЭ (таблица). При этом следует особо отметить, что подобный лечебно-профилактический эффект наблюдается в остром эксперименте при введении сверхвысоких доз синтетического эстрогена. Он проявляется в снижении не только показателей ГЭ, но и объемной плотности гепатоцитов в состоянии жировой дистрофии. Полученные результаты объективно доказывают, что пероральное введение низкомолекулярного хитозана эффективно воздействует на все звенья этиопатогенеза ГЭ и может быть рекомендовано для профилактики не только этого заболевания, но также для предупреждения малигнизации ГЭ и профилактики онкологических заболеваний матки.

ВЫВОДЫ

Низкомолекулярный хитозан при пероральном введении эффективно профилактирует ГЭ и повреждения печени, вызванные гиперэстрогенемией. Низкомолекулярный хитозан при пероральном введении может быть эффективным средством профилактики гормонозависимых пролиферативных заболеваний матки, включая профилактику онкологических заболеваний.

Вклад авторов:
Авторы внесли равный вклад на всех этапах работы и написания статьи.
Contribution of authors:
All authors contributed equally to this work and writing of the article at all stages.

Литература/References

1. Sanderson P. A., Critchley H. O., Williams A. R., Arends M. J., Saunders P. T. New concepts for an old problem: the diagnosis of endometrial hyperplasia. Humenreproductionupdate. 2017; 2 (23): 232-254. DOI: 10.1093/humupd/dmw042.
2. Клинические рекомендации (протокол лечения) Министерства здравоохранения Российской Федерации от 2021 г. «Гиперплазия эндометрия». 35 с. / Ministry of Health of the Russian Federation. (2021). Clinical guidelines (treatment protocol): Endometrial hyperplasia. 35 p. (In Russ.)
3. Nees L. K., Heublein S., Steinmacher S., Juhasz-Böss I., Brucker S., Tempfer C. B., Wallwiener M. Endometrial hyperplasia as a risk factor of endometrial cancer. Archives of gynecology and obstetrics. 2022; 2 (306): 407-421. DOI: 10.1007/s00404-021-06380-5.
4. Ордиянц И. М., Куулар А. А., Ямурзина А. А., Новгинов Д. С. Прогнозирование риска озлокачествления гиперплазии эндометрия в репродуктивном возрасте. Фундаментальная и клиническая медицина. 2020; 5 (1): 57-63. / Ordiyants I. M., Kuular A. A., Yamurzina A. A., Novginov D. S. Predicting the risk of malignisation of endometrial hyperplasia in reproductive age. Fundamentalnaya i klinicheskaya meditsina. 2020; 5 (1): 57-63. (In Russ.)
5. Протасова А. Э., Солнцева И. А., Цыпурдеева А. А., Семиглазова Т. Ю., Стенина М. Б., Юренева С. В., Якушевская О. В. Обоснованные подходы к диагностике и лечению тамоксифен-индуцированных состояний эндометрия у больных раком молочной железы. Журнал акушерства и женских болезней. 2018; 67 (6): 69-78. / Protasova A. E., Solntseva I. A., Tsypurdeeva A. A., Semiglazova T. Yu., Stenina M. B., Yureneva S. V., Yakushevskaya O. V. Substantiated approaches to the diagnosis and treatment of tamoxifen-induced endometrial conditions in patients with breast cancer. Zhurnal akusherstva i zhenskikh bolezney. 2018; 67 (6): 69-78. (In Russ.)
6. Su D., Li L., Zhong M., Xia Y. Capacity of endometrial thickness measurement to diagnose endometrial carcinoma in asymptomatic postmenopausal women: a systematic review and meta-analysis. Annals of palliative medicine. 2021; 10 (10): 10840-10848. DOI: 10.21037/apm-21-2516.
7. Vinklerová P., Felsinger M., Frydová S., Ovesná P., Hausnerová J., Weinberger V. Is the finding of endometrial hyperplasia or corporal polyp an mandatory indication for biopsy? Ceskagynekologie. 2020; 2 (85): 84-93. [Electronic resource]. URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32527101/.
8. Vinklerová P., Ovesná P., Bednaříková M., Minář L., Felsinger M., Hausnerová J., Weinberger V. Does an Endometrial Cancer Diagnosis among Asymptomatic Patients Improve Prognosis? Cancers. 2021; 1 (14): 115. DOI: 10.3390/cancers14010115.
9. Hwang W. Y., Suh D. H., Kim K., No J. H., Kim Y. B. Aspiration biopsy versus dilatation and curettage for endometrial hyperplasia prior to hysterectomy. Diagnosticpathology. 2021; 1 (16): 7. DOI: 10.1186/s13000-020-01065-0.

А. В. Троицкий¹
Т. Н. Быстрова²
К. А. Рожкова³
Н. Н. Мамонтова⁴

¹ Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины, Новосибирск, Россия, pharm2008@yandex.ru, https://orcid.org/0000-0001-9407-5377
² Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины, Новосибирск, Россия, tanibi1@rambler.ru, https://orcid.org/0000-0002-2719-6328
³ Инновационные технологии здоровья, Новосибирск, Россия, Rozhkovak2607@gmail.com
⁴ Инновационные технологии здоровья, Новосибирск, Россия, 3340035@mail.ru

Сведения об авторах:

Троицкий Александр Васильевич, к.м.н., ведущий научный сотрудник, руководитель лаборатории биосовместимых наночастиц, наноматериалов и средств адресной доставки Научно-исследовательского института экспериментальной и клинической медицины, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины»; Россия, 630060, Новосибирск, ул. Тимакова, 2; pharm2008@yandex.ru

Быстрова Татьяна Николаевна, научный сотрудник лаборатории биосовместимых наночастиц, наноматериалов и средств адресной доставки Научно-исследовательского Института экспериментальной и клинической медицины, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины»; Россия, 630060, Новосибирск, ул. Тимакова, 2; tanibi1@rambler.ru

Рожкова Кристина Андреевна, научный сотрудник, Общество с ограниченной ответственностью «Инновационные технологии здоровья»; Россия, 630007, Новосибирск, ул. Фабричная, 55; Rozhkovak2607@gmail.com

Мамонтова Наталья Николаевна, научный сотрудник, Общество с ограниченной ответственностью «Инновационные технологии здоровья»; Россия, 630007, Новосибирск, ул. Фабричная, 55; 3340035@mail.ru

Information about the authors:

Aleksander V. Troitskii, Cand. of Sci. (Med.), Leading Researcher, Head of the Laboratory of Biocompatible Nanoparticles, Nanomaterials and Targeted Delivery Facilities at the Research Institute of Experimental and Clinical Medicine, Federal State Budgetary Scientific Institution Federal Research Center for Fundamental and Translational Medicine; 2 Timakova str., Novosibirsk, 630060, Russia; pharm2008@yandex.ru

Tatyana N. Bystrova, Researcher of the Laboratory of Biocompatible Nanoparticles, Nanomaterials, and Targeted Delivery Systems, Federal State Budgetary Scientific Institution Federal Research Center for Fundamental and Translational Medicine; 2 Timakova str., Novosibirsk, 630060, Russia; tanibi1@rambler.ru

Kristina A. Rozhkova, Researcher, Innovative Technologies of Health Limited Liability Company; 55 Fabrichnaya str., Novosibirsk, 630007, Russia; Rozhkovak2607@gmail.com

Natalya N. Mamontova, Researcher, Innovative Technologies of Health Limited Liability Company; 55 Fabrichnaya str., Novosibirsk, 630007, Russia; 3340035@mail.ru

Экспериментальная оценка эффективности низкомолекулярного хитозана на модели гиперплазии эндометрия/ А. В. Троицкий, Т. Н. Быстрова, К. А. Рожкова, Н. Н. Мамонтова
Для цитирования: Троицкий А. В., Быстрова Т. Н., Рожкова К. А., Мамонтова Н. Н. Экспериментальная оценка эффективности низкомолекулярного хитозана на модели гиперплазии эндометрия. Лечащий Врач. 2026; 6 (29): 16-20. https://doi.org/10.51793/OS.2026.29.6.002
Теги: хитозан, животная модель, матка, пролиферативные процессы, гепатоциты