Резюме
Введение. Диарейный синдром остается одной из наиболее распространенных причин обращаемости за медицинской помощью и значимой причиной заболеваемости как у детей, так и у взрослых. Основа лечения включает регидратационную терапию и коррекцию водно-электролитных нарушений, однако при комплексном ведении пациентов широко применяются пробиотики в качестве адъювантных средств. Традиционные пробиотические микроорганизмы, такие как представители родов Lactobacillus и Bifidobacterium, могут быть чувствительны к воздействию кислой среды желудка, желчных кислот и пищеварительных ферментов, что ограничивает их выживаемость и потенциальную клиническую эффективность при пероральном применении.
Результаты. В этой связи особый интерес представляют споровые пробиотики, обладающие повышенной устойчивостью к агрессивным факторам желудочно-кишечного тракта. Споры бактерий рода Bacillus способны сохранять жизнеспособность при прохождении через желудок и прорастать в кишечнике, что обеспечивает более предсказуемую доставку активных клеток к месту действия. Наиболее изученным представителем спорообразующих пробиотиков является Bacillus clausii. Экспериментальные исследования свидетельствуют о его антимикробных, иммуномодулирующих и противовоспалительных свойствах, а также способности ингибировать действие токсинов отдельных кишечных патогенов и модулировать состав микробиоты. Клинические данные, включая рандомизированные контролируемые исследования, наблюдательные программы и метаанализы, демонстрируют потенциальную эффективность B. clausii в качестве сопутствующей терапии при острой диарее у детей и взрослых, в снижении риска антибиотик-ассоциированной диареи, а также в уменьшении частоты нежелательных явлений на фоне эрадикационной терапии Helicobacter pylori. В ряде работ отмечено сокращение продолжительности диареи и выраженности симптомов, хотя уровень доказательности в отдельных показаниях остается ограниченным и требует дальнейшего уточнения. Профиль безопасности препаратов, содержащих B. clausii, в целом оценивается как благоприятный. В большинстве клинических исследований нежелательные явления регистрировались редко, были преимущественно легкой степени тяжести и не требовали отмены терапии. Описаны единичные случаи инвазивных инфекций, ассоциированных с применением пробиотиков, в том числе B. clausii, преимущественно у пациентов с факторами риска (иммунокомпрометация, недоношенность, наличие внутрисосудистых катетеров). По данным систематических обзоров, доля B. clausii среди зарегистрированных случаев инвазивных осложнений невелика, а общий риск бактериемии и/или сепсиса на фоне его применения представляется низким и сопоставимым либо меньшим по сравнению с рядом других пробиотических микроорганизмов.
Заключение. Таким образом, споровые пробиотики, в частности B. clausii, представляют собой перспективное направление в адъювантной терапии диарейного синдрома благодаря сочетанию повышенной устойчивости, потенциальной клинической эффективности и благоприятного профиля безопасности. Вместе с тем для окончательной оценки их роли в клинической практике необходимы дополнительные крупные, хорошо спланированные исследования с четким определением показаний, режимов дозирования и критериев безопасности, особенно в уязвимых группах пациентов.
Конфликт интересов. Авторы статьи подтвердили отсутствие конфликта интересов, о котором необходимо сообщить.

Во всем мире ежегодно регистрируется более одного миллиарда случаев острой диареи, при этом до 90% из них имеет инфекционную природу [1]. Острый гастроэнтерит у взрослых и детей остается значимой причиной заболеваемости, смертности и существенных экономических затрат для систем здравоохранения различных стран [1, 2]. Диарея представляет собой распространенное желудочно-кишечное расстройство, характеризующееся учащением дефекации до трех и более раз в сутки с выделением водянистого или жидкого стула [3]. Несмотря на тенденцию к снижению заболеваемости и смертности детей в последние годы, диарея по-прежнему входит в число ведущих причин заболеваемости и летальных исходов у детей младше 5 лет [2, 3].

Независимо от длительности заболевания, первоочередной задачей является оценка степени обезвоживания и своевременная коррекция водно-электролитных нарушений. Тяжелая острая инфекционная диарея может вызывать выраженный физиологический стресс вследствие быстрого снижения объема циркулирующей жидкости. При обезвоживании легкой и средней степени предпочтительным методом лечения является пероральная регидратационная терапия. Наличие ортостатической гипотензии, тахикардии, снижения тургора кожи, сухости слизистых оболочек и других признаков гиповолемии может свидетельствовать о тяжелом обезвоживании, требующем проведения внутривенной регидратации с использованием изотонического раствора натрия хлорида или раствора Рингера с лактатом [1, 3].

Диарея, дисбаланс кишечной микробиоты и состояние иммунной системы находятся в тесной взаимосвязи. В период острой диареи в слизистой оболочке кишечника повышается экспрессия провоспалительных цитокинов — интерлейкина-1β (ИЛ-1β), ИЛ-6, гамма-интерферона (ИФН), фактора некроза опухоли альфа, одновременно снижается продукция противовоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-10). В адаптивном звене кишечного иммунитета ключевую роль играют Т-хелперы 17 (Th17) и В-лимфоциты, продуцирующие иммуноглобулин A (IgA), обеспечивающие поддержание иммунного гомеостаза и взаимодействие с микробиотой как в норме, так и при диарее [3].

Пробиотики – это живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных количествах способствуют восстановлению баланса кишечной микробиоты и оказывают благоприятное влияние на здоровье человека [4, 5]. Их эффективность продемонстрирована при диарее различного генеза [2, 3]. Согласно данным систематического обзора и сетевого метаанализа 17 рандомизированных клинических исследований (РКИ), профилактический прием пробиотиков у взрослых достоверно снижал риск развития диареи путешественников по сравнению с плацебо [7]. В метаанализе 25 РКИ при участии 5170 детей с острым гастроэнтеритом показано, что применение пробиотиков ассоциировано с уменьшением продолжительности диареи и частоты рвоты [8].

В то же время установлено, что многие пробиотические микроорганизмы, особенно представители родов Lactobacillus и Bifidobacterium, чувствительны к воздействию кислой среды желудка, желчных кислот (ЖК) и пищеварительных ферментов, что может снижать их выживаемость и, соответственно, клиническую эффективность при пероральном применении [9].

СПОРОВЫЕ ПРОБИОТИКИ

Бактерии рода Bacillus обладают высокой устойчивостью в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) благодаря способности образовывать споры [5, 10, 11], что определяет их потенциал при коррекции дисбиотических нарушений и лечении диареи, в том числе антибиотик-ассоциированной и связанной с инфекцией Clostridioides difficile. Представители рода широко распространены в окружающей среде — обнаруживаются в воздухе, воде, почве, пищевых продуктах и кишечнике человека [9, 10]. К числу наиболее изученных видов относятся Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus, Bacillus clausii, Bacillus coagulans и др. [6].

Пробиотические штаммы рода Bacillus характеризуются широким спектром биологических эффектов: антимикробным, антиоксидантным, противовоспалительным, иммуномодулирующим, а также способностью синтезировать витамины и другие биологически активные соединения [9, 11]. Основные механизмы их действия включают иммуномодуляцию (в том числе стимуляцию лимфоидной ткани кишечника), индукцию продукции противовоспалительных цитокинов и короткоцепочечных жирных кислот – КЦЖК (пропионовой, масляной), конкурентное вытеснение патогенов за счет конкуренции за рецепторы адгезии, а также секрецию антимикробных веществ – бактериоцинов, антибиотикоподобных соединений и ферментов, подавляющих рост возбудителей кишечных инфекций [6, 11-13].

Клинические данные свидетельствуют, что применение споровых пробиотиков может быть эффективным в профилактике и лечении дисбактериоза кишечника у детей, антибиотик-ассоциированной диареи и, в меньшей степени, диареи, связанной с C. difficile. Показано также сокращение продолжительности и частоты эпизодов острой диареи [14].

B. subtilis рассматривается как перспективный пробиотический агент против инфекций, вызванных Salmonella typhimurium, энтеротоксигенными Escherichia coli, Clostridium perfringens и Vibrio parahaemolyticus [15-19]. В экспериментальных моделях продемонстрировано противодиарейное действие B. subtilis у животных при введении липополисахарида Salmonella enteritis [20]. Эффективность данного вида подтверждена и в клиническом исследовании у пациентов с диареей [21].

Для B. clausii описаны выраженные антиоксидантные и иммуномодулирующие свойства [22, 23], протективный эффект в модели ротавирусной инфекции [24], ингибирование цитотоксического действия токсинов C. difficile и B. cereus [25], а также нормализация состава фекальной микрофлоры после ее нарушения ингибиторами протонной помпы [26]. Вегетативные формы B. clausii способны усиливать активность индуцибельной NO-синтазы II, стимулировать продукцию ИФН и пролиферацию CD4+ Т-лимфоцитов [22, 27]. Кроме того, показано, что B. clausii активирует врожденный иммунный ответ и снижает риск инфицирования S. typhimurium serovar Enteritidis [28]. Штаммы B. clausii продуцируют антимикробные вещества, активные в отношении грамположительных бактерий, включая Staphylococcus aureus, Enterococcus faecium и C. difficile [22]. Лантибиотик клаусин, синтезируемый B. clausii, нарушает формирование клеточной стенки бактерий, связываясь с ее компонентами [29]. В экспериментальных моделях у мышей с диареей, индуцированной S. typhimurium, применение B. clausii сопровождалось увеличением численности бактерий-продуцентов КЦЖК и снижением выраженности воспаления [30, 31].

Важной особенностью споровых пробиотиков является их высокая устойчивость к агрессивным факторам ЖКТ. Вегетативные клетки спорообразующих бактерий могут быть чувствительны к кислой среде желудка и действию желчи, однако споры представляют собой устойчивую форму, способную выдерживать экстремальные значения pH, действие ЖК и повышенные температуры [3, 5, 6, 10, 11]. Споры Bacillus проходят через желудок без значительной потери жизнеспособности и в кишечнике прорастают в метаболически активные клетки [10, 12]. В отдельных экспериментах количество спор B. subtilis в кишечнике животных превышало исходное, что связывают с их прорастанием, размножением и повторной споруляцией in situ [32].

Генетические особенности отдельных штаммов также определяют их пробиотический потенциал. Так, штамм B. clausii ENTPro содержит гены устойчивости к ряду антибиотиков (хлорамфениколу, стрептомицину, рифампицину, тетрациклину), продуцирует бактериоцин галлидермин, препятствующий формированию биопленок Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis, а также обладает генетическими детерминантами синтеза фолатов, устойчивости к стрессу и адгезии к эпителию кишечника [33].

Экспериментальные исследования показали, что споры B. clausii UBBC07 сохраняют жизнеспособность в условиях, имитирующих ЖКТ как натощак, так и после приема пищи, и начинают прорастать уже через 3 часа. Синтезируемый ими клаусин устойчив к действию ферментов, температуре и колебаниям pH и проявляет активность против C. difficile [34]. Аналогично споры B. clausii и B. subtilis демонстрируют устойчивость к желудочному и кишечному сокам, обладают повышенной гидрофобностью поверхности, что способствует адгезии к слизистой оболочке, и экспрессируют белки стресс-ответа [35, 36].

Пробиотические свойства нескольких клинически применяемых штаммов B. clausii (N/R, O/C, SIN, T) подтверждены в лабораторных и клинических исследованиях. Эти штаммы выживали в искусственном кишечном соке, демонстрировали высокую адгезию к слизистой, синтезировали антиоксидантные ферменты, β-галактозидазу и рибофлавин [36, 37]. Несмотря на то, что лактобациллы могут демонстрировать большую кислотоустойчивость, B. clausii характеризуется лучшей адаптацией к условиям кишечника [38]. Показано, что штаммы O/C, N/R, SIN и T способны расти при различных значениях pH, устойчивы к ЖК и сохраняют способность к прорастанию после комбинированного воздействия кислоты и желчи [39].

Таким образом, высокая устойчивость спор B. clausii к воздействию факторов ЖКТ создает предпосылки для их клинической эффективности и объясняет полученные данные о длительной персистенции бактерий в кишечнике после приема препарата.

В клиническом исследовании с участием 20 здоровых добровольцев, получавших препарат Энтерожермина (штаммы O/C, N/R, SIN, T) в форме капсул или суспензии, жизнеспособные клетки B. clausii выявлялись в фекалиях до 12 дней после окончания приема. У части участников количество бактерий превышало исходную дозу спор, что свидетельствует о прорастании и размножении в кишечнике [40].

Дополнительные данные о фармакокинетике спор получены в трех рандомизированных перекрестных исследованиях с участием 74 здоровых добровольцев, где оценивали различные лекарственные формы и дозировки препарата. Независимо от формы (суспензия, порошок) и кратности приема, количество выделяемых с калом спор было сопоставимым; споры сохранялись в кишечнике до 8 дней, а профиль высвобождения был сходным во всех группах. Препарат продемонстрировал хорошую переносимость [41].

ЭФФЕКТИВНОСТЬ И БЕЗОПАСНОСТЬ BACILLUS CLAUSII ПРИ ДИАРЕЕ

Европейское общество детской гастроэнтерологии, гепатологии и питания (European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition – ESPGHAN), опираясь на данные систематического обзора эффективности пробиотиков, рекомендует штаммы B. clausii O/C, SIN, N/R и T для лечения детей с острым гастроэнтеритом. При этом степень доказательности таких рекомендаций оценивается как очень низкая, то есть имеющиеся данные допускают потенциальную пользу, однако для надежного подтверждения эффективности необходимы дополнительные исследования [42]. Согласно консенсусу азиатских экспертов, пробиотики, содержащие B. clausii (штаммы O/C, N/R, SIN, T), рекомендованы детям в качестве адъювантной терапии при острой вирусной диарее, а также для профилактики антибиотик-ассоциированной диареи и диареи, связанной с C. difficile, а также в качестве поддержки при эрадикационной терапии H. pylori [43]. В ряде систематических обзоров, метаанализов и клинических исследований показано, что B. clausii может рассматриваться как терапевтический вариант при заболеваниях, протекающих с диареей, у взрослых и детей при благоприятном профиле безопасности (таблица).

Два спорообразующих штамма бактерий – B. subtilis SF106 и B. subtilis SF174 (ранее обозначавшийся как B. clausii) – были выделены из кишечника здоровых людей и сопоставлены в экспериментальной работе (редакция). Оба штамма не продуцировали токсины и другие потенциально повреждающие факторы в отношении клеток человека. В условиях in vitro они демонстрировали выраженную способность к адгезии: прочно связывались с муцином и клетками кишечного эпителия. Кроме того, штаммы синтезировали молекулы с антимикробными свойствами, которые способны подавлять рост патогенных микроорганизмов и препятствовать формированию и персистенции бактериальных биопленок [57].

Безопасность B. clausii была дополнительно подтверждена в исследовании с участием 98 здоровых добровольцев. В рамках работы оценивали влияние пробиотика B. clausii CSI08, Bacillus megaterium [B. megaterium] MIT411 и смеси бактерий рода Bacillus (B. subtilis DE111, B. megaterium MIT411, B. coagulans CGI314 и B. clausii CSI08) на состояние ЖКТ и ряд системных показателей. Участники ежедневно принимали исследуемые препараты или плацебо в течение 45 дней. На фоне приема пробиотиков отмечали статистически значимое снижение частоты жидкого стула на протяжении всего периода наблюдения. При этом не выявили клинически значимых изменений со стороны дыхательной и мочевыводящей систем, а также изменений частоты и консистенции стула вне указанного эффекта. Не отмечали отклонений лабораторных показателей крови, отражающих функции печени и почек. Параметры самочувствия (настроение, сон, аппетит) и частота сердечных сокращений оставались стабильными. Кроме того, не наблюдали изменений уровней провоспалительных цитокинов, антиоксидантов, липидов, аминокислот и минералов. Микробиота кишечника сохраняла разнообразие; неблагоприятных сдвигов в составе бактериального сообщества не выявили. Совокупность результатов указывает на безопасность и хорошую переносимость всех исследованных пробиотических штаммов [58].

При интерпретации данных о безопасности важно учитывать, что род Bacillus включает широкий спектр микроорганизмов: от патогенов, вызывающих тяжелые заболевания (например, Bacillus anthracis), до условно-патогенных представителей (Bacillus cereus) и видов, рассматриваемых как потенциально полезные для человека, включая пробиотические штаммы (Bacillus coagulans, B. licheniformis, B. subtilis). Известно, что пробиотические штаммы Bacillus в редких случаях могут быть ассоциированы с инфекционными осложнениями, преимущественно у лиц с выраженным снижением иммунитета. Внутри одного и того же вида могут встречаться как потенциально опасные, так и безопасные для человека штаммы; у отдельных изолятов возможны гены, кодирующие токсины, либо детерминанты устойчивости к антибиотикам.

Наличие устойчивости к ряду антибиотиков, с одной стороны, может быть клинически значимым и позволяет использовать пробиотики параллельно с антибактериальной терапией при лечении диареи.

С другой стороны, антибиотикорезистентность требует строгой оценки и контроля, поскольку может рассматриваться как потенциальный фактор риска с позиций безопасности. Некоторые виды Bacillus (в частности B. cereus, B. anthracis и B. thuringiensis) способны продуцировать токсины, вызывающие тяжелые заболевания. Поэтому вопрос контроля безопасности пробиотиков, включая препараты на основе Bacillus, остается актуальным. Так, при более детальном изучении были выявлены проблемы безопасности для отдельных штаммов B. cereus, которые были отнесены к микроорганизмам с высоким потенциальным риском для общественного здоровья. В связи с этим в ряде стран были ужесточены меры по безопасности применения препаратов, содержащих данный вид Bacillus, включая отзыв одного из них, предназначенного для ветеринарного применения. Также сообщается, что некоторые другие виды, включая B. licheniformis и B. pumilus, потенциально могут продуцировать токсические факторы, что требует осторожности при их использовании. В целом среди представителей рода Bacillus существуют микроорганизмы с разным уровнем потенциальной опасности, поэтому при выборе пробиотиков принципиально важны оценка баланса пользы и риска, штамм-специфическая характеристика и тщательный контроль безопасности готовых препаратов [11].

Эндоспоры Bacillus играют ключевую роль в их долговечности и способности выживать в экстремальных условиях, что имеет прямое значение для медицинского применения спорообразующих пробиотиков. Образование эндоспор – основной механизм выживания бактерий рода Bacillus. Споры считаются одними из наиболее устойчивых биологических форм: они способны длительно сохранять жизнеспособность и переносить воздействия, которые обычно губительны для большинства других бактерий. Эндоспоры выдерживают высокие температуры (вплоть до автоклавирования при 121 °C), ионизирующее излучение, действие химических растворителей, моющих средств и ферментов, разрушающих клеточные структуры. Это обеспечивает исключительную устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды. В состоянии эндоспоры бактериальная клетка находится в метаболически неактивной форме покоя, что позволяет сохраняться длительное время, потенциально очень продолжительно; при появлении благоприятных условий спора прорастает, и микроорганизм возвращается к активному росту [11].

В то же время после перорального введения спор B. subtilis жизнеспособные споры данного микроорганизма во внутренних органах мышей обнаруживались в минимальных количествах, что указывает на отсутствие высокого риска их транслокации через слизистую оболочку в системный кровоток [32]. В исследовании на крысах токсичности B. subtilis не выявили [59]. В ходе дополнительной генотипической и фенотипической оценки эффективности и безопасности пробиотического штамма B. clausii 088AE были подтверждены отсутствие существенных рисков и наличие ключевых пробиотических признаков, что подкрепляет вывод о безопасности данного штамма для использования в качестве пробиотика [60].

Согласно опубликованным данным, B. clausii безопасна в применении у человека и может рассматриваться как эффективное противодиарейное средство [61]. Для оценки безопасности трех штаммов B. clausii проведены исследования острой и подострой токсичности на крысах и кроликах при пероральном введении. В ходе исследований не выявили признаков токсичности даже при дозах, в сотни раз превышающих терапевтические. Сообщается, что безопасная доза составляла более 126 млрд КОЕ (для сопоставления: обычная терапевтическая доза – 2-6 млрд КОЕ). Штамм UBBC07 B. clausii был устойчив к трем антибиотикам – клиндамицину, эритромицину и хлорамфениколу; гены токсинов отсутствовали. Исследованный штамм характеризовался генетической стабильностью, а устойчивость к антибиотикам, по данным авторов, не могла передаваться другим бактериям. В совокупности эти результаты свидетельствуют о безопасности применения B. clausii штамма UBBC07 у человека. Введение B. clausii штамма PBC429™ мышам с диареей, индуцированной касторовым маслом, приводило к снижению частоты дефекации, частоты эпизодов диареи, общей массы фекалий и относительного количества дефекаций [61-63].

В литературе также описаны клинические случаи инвазивных инфекций, развившихся на фоне применения B. clausii, с различными исходами; часть случаев отмечена у иммунокомпрометированных пациентов. При благоприятном течении сообщалось об ответе на антибактериальную терапию ванкомицином, даптомицином или тейкопланином [60, 64-70]. Одновременно в систематическом обзоре, посвященном риску инвазивных инфекций, ассоциированных с использованием пробиотиков у детей, за период с 1995 по июнь 2021 гг. было выявлено 49 клинических случаев. Возбудителями чаще выступали Lactobacillus spp. (35%), Saccharomyces spp. (29%), Bifidobacterium spp. (31%), реже – B. clausii (4%) и E. coli (2%). Большинство (80%) пациентов были младше двух лет, а наиболее частым клиническим вариантом был сепсис (69,4%). Практически у всех пациентов (за исключением одного) отмечали как минимум одно состояние, предрасполагающее к развитию инвазивной инфекции; наиболее распространенными факторами риска были недоношенность (55%) и использование внутривенного катетера (51%). Летальный исход зарегистрирован у 3 (6%) детей [71].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Споровые пробиотики, по сравнению с неспорообразующими микроорганизмами, обладают рядом преимуществ, прежде всего за счет повышенной выживаемости в ЖКТ и связанных с этим пробиотических эффектов. Показана эффективность применения споровых пробиотиков, включая B. clausii, в составе сопутствующей терапии при диарее у взрослых и детей. Профиль безопасности препаратов, содержащих B. clausii, в целом благоприятный. Риск развития бактериемии и/или сепсиса на фоне приема B. clausii, по имеющимся данным, ниже, чем при использовании некоторых других пробиотических микроорганизмов. С учетом растущего интереса к спорообразующим пробиотикам требуется дальнейшее накопление доказательной базы для более уверенного внедрения в клиническую практику.

Вклад авторов:
Концепция статьи — Ратников В. А., Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Написание текста — Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Сбор и обработка материала — Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Обзор литературы — Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Анализ материала — Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Редактирование — Ратников В. А., Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.
Утверждение окончательного варианта статьи — Ратников В. А., Бакулин И. Г., Ермоленко К. Д.

Contribution of authors:
Concept of the article — Ratnikov V. A., Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Text development — Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Collection and processing of material — Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Literature review — Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Material analysis — Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Editing — Ratnikov V. A., Bakulin I. G., Ermolenko K. V.
Approval of the final version of the article — Ratnikov V. A., Bakulin I. G., Ermolenko K. V.

Литература/References

1. Ferris A., Gaisinskaya P., Nandi N. Approach to diarrhea. Prim Care. 2023 Sept; 50 (3): 447-459.
2. McFarland L. V., Srinivasan R., Setty R. P., Ganapathy S., Bavdekar A., Mitra M., et al. Specific probiotics for the treatment of pediatric acute gastroenteritis in India: A systematic review and meta-analysis. JPGN Rep. 2021; 2 (3): e079.
3. Dang H. T., Tran D. M., Phung T. T. B., Bui A. T. P., Vu Y. H., Luong M. T., et al. Promising clinical and immunological efficacy of Bacillus clausii spore probiotics for supportive treatment of persistent diarrhea in children. Sci Rep. 2024; 14 (1): 6422.
4. Lahiri K. R., Singh R., Apte M., Patil M., Taksande A., Varona R., et al. Efficacy and safety of Bacillus clausii (O/C, N/R, SIN, T) probiotic combined with oral rehydration therapy (ORT) and zinc in acute diarrhea in children: a randomized, double-blind, placebo-controlled study in India. Trop Dis Travel Med Vaccines. 2022; 8 (1): 9.
5. Soares M. B., Almada C. N., Pereira E. P. R., Ferreira B. M., Balthazar C. F., Khorshidian N., et al. Review – Sporeforming probiotic bacteria: Characteristics, health benefits, and technological aspects for their applications in foods and beverages. Trends in Food Science & Technology. 2023; 138: 453-469.
6. Duc L. H., Hong H. A., Barbosa T. M., Henriques A. O., Cutting S. M. Characterization of Bacillus probiotics available for human use. Appl Environ Microbiol. 2004; 70 (4): 2161-2171.
7. Fan H., Gao L., Yin Z., Ye S., Zhao H., Peng Q. Probiotics and rifaximin for the prevention of travelers’ diarrhea: A systematic review and network meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2022; 101 (40): e30921.
8. Alsabri M., Rath S., Abo-Elnour D. E., Shaban N. S., Aziz M. M., Aboali A. A., et al. Efficacy of probiotics in reducing the duration and severity of acute gastroenteritis in children: A meta-analysis of randomized controlled trials. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2025; 81 (4): 1000-1009.
9. Payne J., Bellmer D., Jadeja R., Muriana P. The potential of Bacillus species as probiotics in the food industry: a review. Foods. 2024; 13 (15): 2444.
10. Ghelardi E., Abreu Y. Abreu A. T., Marzet C. B., Álvarez Calatayud G., Perez M., Moschione Castro A. P. Current progress and future perspectives on the use of Bacillus clausii. Microorganisms. 2022; 10 (6): 1246.
11. Todorov S. D., Ivanova I. V., Popov I., Weeks R., Chikindas ML. Bacillus spore-forming probiotics: benefits with concerns? Crit Rev Microbiol. 2022; 48 (4): 513-530.
12. Casula G., Cutting S. M. Bacillus probiotics: spore germination in the gastrointestinal tract. Appl Environ Microbiol. 2002; 68 (5): 2344-2352.
13. Calvigioni M., Bertolini A., Codini S., Mazzantini D., Panattoni A., Massimino M., et al. HPLC-MS-MS quantification of short-chain fatty acids actively secreted by probiotic strains. Front Microbiol. 2023; 14: 1124144.
14. Kesavelu D., Jog P. Current understanding of antibiotic-associated dysbiosis and approaches for its management. Ther Adv Infect Dis. 2023; 10: 20499361231154443.
15. Bai H., Liao Y., Lu J., Pei Z., Yin Y., Ma C., et al. In vitro antibacterial efficacy of a novel chicken-derived Bacillus subtilis GX15 strain and its protective mechanisms in mice challenged by Salmonella enterica serovar typhymurium. BMC Microbiol. 2025; 25 (1): 380.
16. Qin J., Liu Y., Cao M., Zhang Y., Bai G., Shi B. Bacillus subtilis MZ-01 alleviates diarrhea caused by ETEC K88 by reducing inflammation and promoting intestinal health. J Appl Microbiol. 2025; 136 (2): lxaf018.
17. Xu Z., Feng X., Song Z., Li X., Li K., Li M., et al. Cell-free supernatant of Bacillus subtilis G2B9-Q improves intestinal health and modulates immune response to promote mouse recovery in Clostridium perfringens infection. Curr Microbiol. 2024; 81 (8): 243.
18. Chen Y. A., Chiu W. C., Wang T. Y., Wong H. C., Tang C. T. Isolation and characterization of an antimicrobial Bacillus subtilis strain O-741 against Vibrio parahaemolyticus. PLoS One. 2024; 19 (4): e0299015.
19. Wang J., Wen B., Zeng Y., Wang H., Zhao W., Zhou Y., et al. Assessment the role of some Bacillus strains in improvement rex rabbits resistance against ETEC challenge. Microb Pathog. 2022; 165: 105477.
20. Urdaci M. C., Lefevre M., Lafforgue G., Cartier C., Rodriguez B., Fioramonti J. Antidiarrheal action of Bacillus subtilis CU1 CNCM I-2745 and Lactobacillus plantarum CNCM I-4547 in Mice. Front Microbiol. 2018; 9: 1537.
21. Ghosh A., Sundaram B., Bhattacharya P., Mohanty N., Dheivamani N., Mane S., et al. Effect of Saccharomyces boulardii CNCM-I 3799 and Bacillus subtilis CU-1 on acute watery diarrhea: a randomized double-blind placebo-controlled study in indian children. Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr. 2021; 24 (5): 423-431.
22. Urdaci M. C., Bressollier P., Pinchuk I. Bacillus clausii probiotic strains:antimicrobial and immunomodulatory activities. J Clin Gastroenterol. 2004; 38 (6 Suppl): S86-90.
23. Khokhlova E., Colom J., Simon A., Mazhar S., García-Lainez G., Llopis S., et al. Immunomodulatory and antioxidant properties of a novel potential probiotic Bacillus clausii CSI08. Microorganisms. 2023; 11 (2): 240.
24. Paparo L., Tripodi L., Bruno C., Pisapia L., Damiano C., Pastore L., et al. Protective action of Bacillus clausii probiotic strains in an in vitro model of Rotavirus infection. Sci Rep. 2020; 10 (1): 12636.
25. Ripert G., Racedo S. M., Elie A. M., Jacquot C., Bressollier P., Urdaci M. C. Secreted compounds of the probiotic Bacillus clausii strain O/C inhibit the cytotoxic effects induced by Clostridium difficile and Bacillus cereus toxins. Antimicrob Agents Chemother. 2016; 60 (6): 3445-3454.
26. Duysburgh C., Verstrepen L., Broeck M. V. den, Righetto Z., Perez M. Investigation of Enterogermina’s protective and restorative mechanisms on the gut microbiota with PPI, using SHIME technology. Nutrients. 2023; 15 (3): 653.
27. Villéger R., Saad N., Grenier K., Falourd X., Foucat L., Urdaci M. C., et al. Characterization of lipoteichoic acid structures from three probiotic Bacillus strains: involvement of D-alanine in their biological activity. Antonie Van Leeuwenhoek. 2014; 106 (4): 693-706.
28. Pradhan B., Guha D., Ray P., Das D., Aich P. Comparative analysis of the effects of two probiotic bacterial strains on metabolism and innate immunity in the RAW 264.7 murine macrophage cell line. Probiotics Antimicrob Proteins. 2016; 8 (2): 73-84.
29. Bouhss A., Al-Dabbagh B., Vincent M., Odaert B., Aumont-Nicaise M., Bressolier P., et al. Specific interactions of clausin, a new lantibiotic, with lipid precursors of the bacterial cell wall. Biophys J. 2009; 97 (5): 1390-1397.
30. Pradhan B., Guha D., Naik AK., Banerjee A., Tambat S., Chawla S., et al. Probiotics L. acidophilus and B. clausii modulate gut microbiota in TH1- and TH2-biased mice to ameliorate salmonella typhimurium-induced diarrhea. Probiotics Antimicrob Proteins. 2019; 11 (3): 887-904.
31. Pirozzi C., Opallo N., Coretti L., Lama A., Annunziata C., Comella F., et al. Alkalihalobacillus clausii (formerly Bacillus clausii) spores lessen antibiotic-induced intestinal injury and reshape gut microbiota composition in mice. Biomed Pharmacother. 2023; 163: 114860.
32. Hoa T. T., Duc L. H., Isticato R., Baccigalupi L., Ricca E., Van P. H., et al. Fate and dissemination of Bacillus subtilis spores in a murine model. Appl Environ Microbiol. 2001; 67 (9): 3819-3823.
33. Khatri I., Sharma G., Subramanian S. Composite genome sequence of Bacillus clausii, a probiotic commercially available as Enterogermina®, and insights into its probiotic properties. BMC Microbiol. 2019; 19 (1): 307.
34. Ahire J. J., Kashikar M. S., Madempudi R. S. Survival and germination of Bacillus clausii UBBC07 spores in in vitro human gastrointestinal tract simulation model and evaluation of clausin production. Front Microbiol. 2020; 11: 1010.
35. Ahire J. J., Kashikar M. S., Madempudi R. S. Comparative accounts of probiotic properties of spore and vegetative cells of Bacillus clausii UBBC07 and in silico analysis of probiotic function. 3 Biotech. 2021; 11 (3): 116.
36. Nguyen N. H. K., Giang B. L., Truc T. T. Isolation and evaluation of the probiotic activity of lactic acid bacteria isolated from Pickled brassica juncea (l) czern. et coss. Foods. 2023; 12 (20): 3810.
37. Mazzantini D., Calvigioni M., Celandroni F., Lupetti A., Ghelardi E. In vitro assessment of probiotic attributes for strains contained in commercial formulations. Sci Rep. 2022; 12 (1): 21640.
38. De Vecchi E., Nicola L., Zanini S., Drago L. In vitro screening of probiotic characteristics of some italian products. J Chemother. 2008; 20 (3): 34-347.
39. Cenci G., Trotta F., Caldini G. Tolerance to challenges miming gastrointestinal transit by spores and vegetative cells of Bacillus clausii. J Appl Microbiol. 2006; 101 (6): 1208-1215.
40. Ghelardi E., Celandroni F., Salvetti S., Gueye S. A., Lupetti A., Senesi S. Survival and persistence of Bacillus clausii in the human gastrointestinal tract following oral administration as spore-based probiotic formulation. J Appl Microbiol. 2015; 119 (2): 552-559.
41. Navarra P., Milleri S., Perez Iii M., Uboldi M. C., Pellegrino P., Bois De Fer B., et al. Kinetics of intestinal presence of spores following oral administration of Bacillus clausii formulations: three single-centre, crossover, randomised, open-label studies. Eur J Drug Metab Pharmacokinet. 2021; 46 (3): 375-384.
42. Szajewska H., Guarino A., Hojsak I., Indrio F., Kolacek S., Orel R., et al. Use of probiotics for the management of acute gastroenteritis in children: an update. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2020; 71 (2): 261-269.
43. De Castro J. A., Kesavelu D., Lahiri K. R., Chaijitraruch N., Chongsrisawat V., Jog P. P., et al. Recommendations for the adjuvant use of the poly-antibiotic-resistant probiotic Bacillus clausii (O/C, SIN, N/R, T) in acute, chronic, and antibiotic-associated diarrhea in children: consensus from Asian experts. Trop Dis Travel Med Vaccines. 2020; 6: 21.
44. Abreu A. T., Vázquez Frías R., Boggio Marzet C., Stefanolo J. P., Concha Mejía A., Bustos Fernández L., et al. Effectiveness of bacillus clausii (C/C, N/R, SIN, T) in the prevention of antibiotic-associated diarrhea and gastrointestinal symptoms: a systematic review. Antibiotics (Basel). 2025; 14 (5): 439.
45. Plomer M., Iii Perez M., Greifenberg D. M. Effect of Bacillus clausii capsules in reducing adverse effects associated with helicobacter pylori eradication therapy: a randomized, double-blind, controlled trial. Infect Dis Ther. 2020; 9 (4): 867-878.
46. Nista E. C., Candelli M., Cremonini F., Cazzato I. A., Zocco M. A., Franceschi F., et al. Bacillus clausii therapy to reduce side-effects of anti-Helicobacter pylori treatment: randomized, double-blind, placebo controlled trial. Aliment Pharmacol Ther. 2004; 20 (10): 1181-1188.
47. Sudha M. R., Bhonagiri S., Kumar M. A. Efficacy of Bacillus clausii strain UBBC-07 in the treatment of patients suffering from acute diarrhoea. Benef Microbes. 2013; 4 (2): 211-216.
48. Acosta-Rodríguez-Bueno C. P., Abreu Y. Abreu A. T., Guarner F., Guno M. J. V., Pehlivanoğlu E., Perez M. Bacillus clausii for gastrointestinal disorders: a narrative literature review. Adv Ther. 2022; 39 (11): 4854-4874.
49. Michel M. C., Pellegrino P. A comprehensive review and meta-analysis on the treatment of acute gastroenteritis in children with a Bacillus clausii preparation (Enterogermina®). Adv Ther. 2025; 42 (7): 3076-3088.
50. Ianiro G., Rizzatti G., Plomer M., Lopetuso L., Scaldaferri F., Franceschi F., et al. Bacillus clausii for the treatment of acute diarrhea in children: A systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Nutrients. 2018; 10 (8): 1074.
51. Sudha M. R., Jayanthi N., Pandey D. C., Verma A. K. Bacillus clausii UBBC-07 reduces severity of diarrhoea in children under 5 years of age: a double blind placebo controlled study. Benef Microbes. 2019; 10 (2): 149-54.
52. Altcheh J., Carosella M. V., Ceballos A., D’Andrea U., Jofre S. M., Marotta C., et al. Randomized, direct comparison study of Saccharomyces boulardii CNCM I-745 versus multi-strained Bacillus clausii probiotics for the treatment of pediatric acute gastroenteritis. Medicine (Baltimore). 2022 Sept 9; 101 (36): e30500.
53. Canani RB., Cirillo P., Terrin G., Cesarano L., Spagnuolo M. I., De Vincenzo A., et al. Probiotics for treatment of acute diarrhoea in children: randomised clinical trial of five different preparations. BMJ. 2007; 335 (7615): 340.
54. Dang H. T., Phung T. T. B., Tran D. M., Bui A. T. P., Vu Y. H., Luong M. T., et al. High-dose multi-strain Bacillus probiotics enhance treatment and reduce antibiotic usage in children with persistent diarrhea through immune and microbiota modulation. Sci Rep. 2025; 15 (1): 30231.
55. Smiyan O. I., Smiian-Horbunova K O., Bynda T. P., Loboda A. M., Popov S. V., Vysotsky I. Y., et al. Optimization of the treatment of rotavirus infection in children by using bacillus clausii. Wiad Lek. 2019; 72 (7): 1320-1323.
56. De Castro J. A. A., Guno M. J. V. R., Perez M. O. Bacillus clausii as adjunctive treatment for acute community-acquired diarrhea among Filipino children: a large-scale, multicenter, open-label study (CODDLE). Trop Dis Travel Med Vaccines. 2019; 5: 14.
57. Saggese A., Giglio R., D’Anzi N., Baccigalupi L., Ricca E. Comparative genomics and physiological characterization of two aerobic spore formers isolated from human ileal samples. Int J Mol Sci. 2022; 23 (23): 14946.
58. Rea K., Colom J., Simon E. A., Khokhlova E., Mazhar S., Barrena M., et al. Evaluation of Bacillus clausii CSI08., Bacillus megaterium MIT411 and a Bacillus cocktail on gastrointestinal health: a randomised, double-blind, placebo-controlled pilot study. Benef Microbes. 2023; 14 (2): 165-182.
59. Negi A., Pasam T., Farqadain S. M., Mahalaxmi Y., Dandekar M. P. In-vitro and preclinical testing of bacillus subtilis UBBS-14 probiotic in rats shows no toxicity. Toxicol Res (Camb). 2024; 13 (1): tfae021.
60. Saroj D. B., Ahire J. J., Shukla R. Genetic and phenotypic assessments for the safety of probiotic Bacillus clausii 088AE. 3 Biotech. 2023; 13 (7): 238.
61. Shaikh S. S., Patel S. S., Verma S., Malik A., Malek F. Safety assessment and efficacy of probiotic Bacillus clausii PBC429TM (MTCC 25459) for management of diarrhea. Probiotics Antimicrob Proteins. 2025 Aug 7.
62. Ngo N. Q. A., Nguyen H. T., Dam X. T., Bui D. N., Minh T. T. Oral toxicity evaluation of Bacillus clausii M31 isolated from the children’s feces in the northern province of Vietnam. Toxicol Res (Camb). 2024; 13 (5): tfae152.
63. Lakshmi S. G., Jayanthi N., Saravanan M., Ratna M. S. Safety assesment of Bacillus clausii UBBC07, a spore forming probiotic. Toxicol Rep. 2017; 4: 62-71.
64. Princess I., Natarajan T., Ghosh S. When good bacteria behave badly: a case report of Bacillus clausii sepsis in an immunocompetant adult. Access Microbiol. 2020; 2 (4): acmi000097.
65. García J. P., Hoyos J. A., Alzate J. A., Cristancho E. Bacteremia after Bacillus clausii administration for the treatment of acute diarrhea: A case report. Biomedica. 2021; 41 (Sp. 2): 13-20.
66. Khatri A. M., Rai S., Shank C., McInerney A., Kaplan B., Hagmann S. H. F., et al. A tale of caution: prolonged Bacillus clausii bacteraemia after probiotic use in an immunocompetent child. Access Microbiol. 2021; 3 (3): 000205.
67. Mohamed R., Sharma A., Al Maslamani E., Shurab N., Pérez-López A., Suleiman M. Bacillus clausii bacteremia after probiotic usage in a preterm neonate with short bowel syndrome. Pediatr Infect Dis J. 2025; 44 (5): e191-192.
68. Corredor-Rengifo D., Tello-Cajiao M. E., García-Molina F. A., Montero-Riascos L. F., Segura-Cheng J. D. Bacillus clausii bacteremia following probiotic use: A report of two cases. Cureus. 2024; 16 (4): e57853.
69. Muñoz M., Castaño G. E., Esquivel Suman R., Alvarado M. Septicemia due to Bacillus clausii after the use of probiotics. A complication to keep in mind. Andes Pediatr. 2023; 94 (3): 379-385.
70. Joshi S., Udani S., Sen S., Kirolikar S., Shetty A. Bacillus clausii septicemia in a pediatric patient after treatment with probiotics. Pediatr Infect Dis J. 2019; 38 (9): e228-230.
71. D’Agostin M., Squillaci D., Lazzerini M., Barbi E., Wijers L., Da Lozzo P. Invasive infections associated with the use of probiotics in children: A systematic review. Children (Basel). 2021; 8 (10): 924.

В. А. Ратников¹
И. Г. Бакулин²
К. В. Ермоленко³

¹ Федеральный научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства, Санкт-Петербург, Россия, Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия, dr.ratnikov@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-9645-8408
² Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, igbakulin@yandex.ru, https://orcid.org/0000-0002-6151-2021
³ Федеральный научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства, Санкт-Петербург, Россия, ermolenko.kd@yandex.ru, https://orcid.org/0000-0002-1730-8576

Сведения об авторах:

Ратников Вячеслав Альбертович, д.м.н., профессор, генеральный директор, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства» России; Россия, 197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9А; профессор кафедры лучевой диагностики, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный университет»; Россия, 199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9; dr.ratnikov@mail.ru

Бакулин Игорь Геннадьевич, д.м.н., профессор, главный внештатный специалист-терапевт Министерства здравоохранения Российской Федерации по Северо-Западному федеральному округу Российской Федерации, главный внештатный специалист-гастроэнтеролог Ленинградской области, директор Института терапии, заведующий кафедрой пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и диетологии им. С. М. Рысса, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Россия, 195067, Санкт-Петербург, Пискаревский пр., 47; igbakulin@yandex.ru

Ермоленко Константин Дмитриевич, д.м.н., заместитель генерального директора по научной и образовательной деятельности, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства» России; Россия, 197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9А; ermolenko.kd@yandex.ru

Information about the authors:

Viacheslav A. Ratnikov, Dr. of Sci. (Med.), Professor, Acting General Director, Federal State Budgetary Institution Federal Scientific and Clinical Center for Infectious Diseases of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; 9A Professora Popova str., Saint Petersburg, 197022, Russia; Professor of the Department of Radiology, Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Saint Petersburg State University; 7-9 Universitetskaya nab., Saint Petersburg, 199034, Russia; dr.ratnikov@mail.ru

Igor G. Bakulin, Dr. of Sci. (Med.), Professor, Chief Non-staff Specialist in Internal Medicine of the Ministry of Health of the Russian Federation for the North-Western Federal District, Chief Non-staff Gastroenterologist of the Leningrad Region, Director of the Institute of Therapy, Head of the Department of Propedeutics of Internal Diseases, Gastroenterology and Dietology named after S. M. Ryss, Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education I. I. Mechnikov Northwestern State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation; 47 Piskarevsky ave., Saint Petersburg, 195067, Russia; igbakulin@yandex.ru

Konstantin D. Ermolenko, Dr. of Sci. (Med.), Deputy General Director for Science and Education, Federal State Budgetary Institution Federal Scientific and Clinical Center for Infectious Diseases of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; 9A Professora Popova str., Saint Petersburg, 197022, Russia; ermolenko.kd@yandex.ru

Эффективность и безопасность споровых пробиотиков при диарейном синдроме/ В. А. Ратников, И. Г. Бакулин, К. В. Ермоленко
Для цитирования: Ратников В. А., Бакулин И. Г., Ермоленко К. В. Эффективность и безопасность споровых пробиотиков при диарейном синдроме. Лечащий Врач. 2026; 5 (29): 25-33. https://doi.org/10.51793/OS.2026.29.5.003
Теги: дети, взрослые, диарейный синдром, пробиотические микроорганизмы